新冠核酸檢測PCR建設要點(diǎn)

核酸檢測中，應該如何{建設一個(gè)標準的PCR實(shí)驗室}PCR實(shí)驗室如何設計規劃才堪稱(chēng)專(zhuān)業(yè)？PCR實(shí)驗室管理又有哪些注意要點(diǎn)？

PCR實(shí)驗室分為六個(gè)區域，分別為：

1.更換防護服區域

2試劑配制區；

3.樣品處理區；

4.核酸擴增區；

5.產(chǎn)物分析區

6.消毒滅菌區

傳統PCR為四個(gè)區域，為配合新冠核酸檢測沃霖實(shí)驗室建議增設兩個(gè)區域，一個(gè)區域為前段更換防護服，一個(gè)區域為 消毒滅菌室區。

一、PCR實(shí)驗室設計規劃

如使用全自動(dòng)分析儀，區域可適當合并。

沃霖實(shí)驗建議：進(jìn)入各工作區域必須嚴格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區域使用不同的工作服，例如不同的顏色。工作人員離開(kāi)各工作區域時(shí)，不得將工作服帶出

二、PCR實(shí)驗室平面布局

試劑準備區：擴增試劑的配制、分裝和保存。

樣品處理區：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。

擴增產(chǎn)物分析區：擴增產(chǎn)物的測定、結果分析、登記及報告

擴增前區與擴增后區應嚴格分開(kāi)，須使用不同的房間，兩區之間好有一定的間隔。

使用商品化試劑盒可在樣品處理區進(jìn)行少量試劑配制。

在滿(mǎn)足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區和試劑準備區可設在同一房間內：

在生物安全柜內操作；

每個(gè)實(shí)驗人員、實(shí)驗組分別使用各自的試劑及耗材；

盛放污染材料的器皿密封并一次性使用；

用有效的方法對操作區域和共享器具在實(shí)驗前后進(jìn)行清潔及消毒。

三、PCR實(shí)驗室建設規劃介紹

1、主體結構：

主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金50內圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結構牢固，線(xiàn)條簡(jiǎn)明，美觀(guān)大方，密封性好。

2、標準的三區分隔和氣壓調節：

將PCR過(guò)程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個(gè)獨立的實(shí)驗區。整個(gè)區域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨立實(shí)驗區設置有緩沖區，同時(shí)各區通過(guò)氣壓調節，使整個(gè)PCR實(shí)驗過(guò)程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

可打開(kāi)緩沖區Ⅰ，緩沖區Ⅱ和PCR擴增區的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗區的外墻上和各扇門(mén)上都安裝有風(fēng)量可調的回風(fēng)口，空氣通過(guò)回風(fēng)口向室內換氣。

3、消毒：

在三個(gè)實(shí)驗區和三個(gè)緩沖區頂部以及傳送窗內部安裝有紫外燈，供消毒用。

在試劑準備區和標本制備區還設置移動(dòng)紫外線(xiàn)燈，對實(shí)驗桌進(jìn)行局部消毒。

4、機械連鎖不銹鋼傳遞窗：

試劑和標本通過(guò)機械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過(guò)程中不受污染（人物分流）

5、地面

地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒(méi)有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm×800mm）接縫需要小于2mm。

6、照明

燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。

在建設的過(guò)程中應注意

●規范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。

●嚴格按照規范科學(xué)設計的安裝流程。

●安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進(jìn)線(xiàn)位置，電話(huà)網(wǎng)絡(luò )線(xiàn)進(jìn)線(xiàn)位置，進(jìn)水水壓，小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。

四、PCR實(shí)驗室設計要點(diǎn)

PCR實(shí)驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗，通常應經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗過(guò)程，若實(shí)驗工藝需要，還應增加樣品粉碎過(guò)程。

一、分散形式PCR實(shí)驗室

所謂分散形式PCR實(shí)驗室，是指完成上述實(shí)驗過(guò)程的實(shí)驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實(shí)驗室，由于各個(gè)實(shí)驗之間不易相互干擾，因此無(wú)需特殊條件要求。

二、組合形式PCR實(shí)驗室

所謂組合形式PCR實(shí)驗室,是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗過(guò)程的實(shí)驗用房相鄰布置，組成獨立實(shí)驗區域的形式。對于組合形式PCR實(shí)驗室，由于各個(gè)實(shí)驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間，以減少室內外空氣交換。

PCR實(shí)驗室建設一些經(jīng)驗分享：

試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染；

可以通過(guò)控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達到正壓效果。

核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應呈微負壓，以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品，可以通過(guò)控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達到負壓效果。

在理想情況下，PCR實(shí)驗室緩沖間內，可設置正壓，使室內空氣不流向室外，室外空氣不流向室內。PCR實(shí)驗室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調控制，要求將中央空調風(fēng)口安裝到指定定點(diǎn)，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。

如果使用熒光PCR儀，擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并。

若房間進(jìn)深允許，可設PCR內部專(zhuān)用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方面，緩沖間比專(zhuān)用走廊更有意義。

各個(gè)區域之間應具備單向的實(shí)驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實(shí)驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實(shí)驗過(guò)程造成污染產(chǎn)生假性結果。